采(cai)用酶抑制(zhi)原理和(he)光(guang)電(dian)比色(se)法原理研(yan)制(zhi)而成。在壹定(ding)條(tiao)件下(xia),有(you)機(ji)磷(lin)和(he)氨基甲酸類農(nong)藥對(dui)膽堿酯酶正常功(gong)能(neng)有抑制(zhi)作用(yong),其抑制(zhi)率(lv)與(yu)農(nong)藥(yao)的濃(nong)度呈正相(xiang)關。正常情況(kuang)下(xia),酶催化神經(jing)傳(chuan)導代謝(xie)產(chan)物(wu)(乙酰(xian)膽堿)水解,其水解產(chan)物(wu)與(yu)顯(xian)色(se)劑反應,產生(sheng)黃色(se)物質,用分(fen)光(guang)光(guang)度計測(ce)定(ding)412nm下(xia)吸(xi)光(guang)度隨時(shi)間的變化(hua)值,計算出抑(yi)制(zhi)率(lv),通(tong)過(guo)抑(yi)制(zhi)率(lv)可以(yi)判(pan)斷(duan)出樣(yang)品中(zhong)是(shi)否含有有(you)機(ji)磷(lin)或(huo)氨基甲酸酯類(lei)農藥(yao)的殘(can)留(liu)。可以(yi)實現(xian)有機(ji)磷(lin)及氨基甲酸酯類(lei)農藥(yao)殘(can)留(liu)量的現(xian)場(chang)快(kuai)速(su)檢(jian)測。它可以(yi)廣泛應(ying)用於(yu)產品質(zhi)量監(jian)督檢(jian)驗(yan)、衛(wei)生(sheng)防疫、環(huan)境保(bao)護、工(gong)商(shang)管理(li)、蔬菜批發(fa)市(shi)場(chang)、蔬(shu)菜生(sheng)產(chan)基地(di)、超(chao)市(shi)、商(shang)場(chang)、農(nong)藥(yao)殘(can)留(liu)監測(ce)系(xi)統等(deng)部門(men)的蔬菜和(he)水果(guo)中(zhong)的農藥(yao)殘(can)毒檢測(ce)。
農(nong)殘(can)檢(jian)測儀(yi)的使用(yong)方(fang)法(fa):
1、開機(ji)
插(cha)上電(dian)源,打(da)開儀(yi)器(qi)背面(mian)綠色(se)電(dian)源開關(guan),儀(yi)器顯(xian)示開機(ji)畫(hua)面,按畫(hua)面提示操(cao)作,按下(xia)回車鍵(jian),儀(yi)器(qi)開始自檢,時(shi)間約1min。自檢完(wan)畢(bi)後(hou),儀器進入(ru)待(dai)機(ji)檢(jian)測狀態。
2、試劑(ji)配制(zhi)(配套試劑(ji):LS農殘(can)速(su)測(ce)試劑(ji))
①緩沖(chong)液:取1包緩沖劑(ji)加入(ru)500mL蒸餾水(shui)或(huo)純凈水中(zhong),攪(jiao)拌溶(rong)解制(zhi)成磷酸緩沖(chong)液(pH7.6), 常溫保(bao)存。
②顯(xian)色(se)劑:取1瓶顯(xian)色(se)劑加25mL緩(huan)沖(chong)液溶(rong)解,使(shi)用(yong)時(shi)取100μL,4℃冰(bing)箱保存。
③底(di) 物(wu):取1瓶底(di)物(wu)加12.5mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)純凈水溶(rong)解,使(shi)用(yong)時(shi)取100μL,4℃冰(bing)箱保存;或(huo)取1瓶底(di)物(wu)加2.5mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)純凈水溶(rong)解 ,使(shi)用(yong)時(shi)取20μL,4℃冰(bing)箱保存。
④膽堿酯酶:酶制(zhi)劑無需(xu)配制(zhi),可直接取用,使用時(shi)取100μL,4℃冰(bing)箱保存。
3、樣品提取
取2g果蔬樣品(塊(kuai)莖(jing)類(lei)取4g),葉菜剪成25px左(zuo)右見方(fang)的碎(sui)片(pian),塊(kuai)莖(jing)類(lei)取橫(heng)截(jie)面樣(yang)品或(huo)取其表皮(pi),放入(ru)三角(jiao)瓶(ping)中(zhong),加入(ru)10mL緩沖(chong)液,振(zhen)蕩(dang)1~2min ,倒出提取液,靜置2min,待(dai)測。若提取液混濁(zhuo)或(huo)雜質(zhi)太多可過濾後再(zai)測。
4、測(ce)試
①對(dui)照測(ce)試:於(yu)反應(ying)瓶(ping)中(zhong)加入(ru)2.5mL緩沖(chong)液,再(zai)分(fen)別(bie)加入(ru)100μL酶液和(he)顯(xian)色(se)劑,混勻(yun),靜置反應(ying)10min後加入(ru)100μL(或(huo)20μL)底(di)物(wu),搖(yao)勻(yun)並(bing)立(li)即倒入(ru)比色(se)杯中(zhong),及時(shi)放(fang)入(ru)儀器(qi)的測量室第(di)1通道(dao),合上蓋。按鍵(jian),顯(xian)示屏(ping)下(xia)方(fang)延(yan)遲(chi)10s後(hou),測量時(shi)間開始倒計時(shi),計時(shi)完(wan)畢(bi),顯(xian)示屏(ping)顯(xian)示吸光(guang)度增(zeng)量(ΔΑ0)及抑制(zhi)率(lv)。在(zai)進(jin)行(xing)對照測試時(shi),2~8通(tong)道(dao)可同(tong)時(shi)進(jin)行樣品測(ce)試。
②樣(yang)品測(ce)試:於(yu)反應(ying)瓶(ping)中(zhong)加入(ru)2.5mL待(dai)測液,再(zai)分(fen)別(bie)加入(ru)100μL酶液和(he)顯(xian)色(se)劑,混勻(yun),靜置反應(ying)10min後加入(ru)100μL(或(huo)20μL)底(di)物(wu),搖(yao)勻(yun)並(bing)立(li)即倒入(ru)比色(se)杯中(zhong),及時(shi)放(fang)入(ru)儀器(qi)的測量室通(tong)道(dao),合上蓋。按
鍵(jian),顯(xian)示屏(ping)下(xia)方(fang)延(yan)遲(chi)10s後(hou),測量時(shi)間開始倒計時(shi),計時(shi)完(wan)畢(bi),顯(xian)示屏(ping)顯(xian)示吸光(guang)度增(zeng)量(ΔΑt)及抑制(zhi)率(lv)。數(shu)據(ju)自動(dong)保存,如有需(xu)要(yao)按鍵(jian)打(da)印。